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兔腦血管痙攣模型(1)復(fù)制方法新西蘭兔,雌雄不拘,體重為2.0~2.5kg。1)自體血注入經(jīng)耳緣靜脈注射戊丨巴丨比丨妥丨鈉(按25~30mg/kg體重的劑量)或20%烏拉坦(按5ml/kg體重的劑量)麻醉,左側(cè)臥位固定,剪除手術(shù)區(qū)域毛發(fā),皮膚消毒。切口垂直于顴弓并經(jīng)其中點(diǎn),上達(dá)顳上線,下達(dá)顴弓下0.5cm,一次切開直達(dá)顴骨鱗部,鉆孔后擴(kuò)大成窗,充分顯露中顱窩底。剪開硬膜,抬起顎葉,吸除腦脊液,使腦葉塌陷。沿蝶骨大翼探至視神經(jīng)處,將塑料導(dǎo)管剪成1.5cm長(zhǎng),管端放在視神經(jīng)外側(cè)。...
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記憶障礙動(dòng)物模型引起動(dòng)物的記憶障礙有多種方法,包括電休克、缺血缺氧、某些化學(xué)藥品等。對(duì)記憶障礙的測(cè)定則采用學(xué)習(xí)記憶的實(shí)驗(yàn)方法。在此先介紹常用的學(xué)習(xí)記憶實(shí)驗(yàn)法。1學(xué)習(xí)、記憶實(shí)驗(yàn)法(learnandmemorytest)人們和動(dòng)物的精神活動(dòng)、心理狀態(tài)都是無法直接觀察到的。為了研究這些活動(dòng)的發(fā)生過程,科學(xué)家們只能根據(jù)可觀察到的刺激反應(yīng)進(jìn)行推測(cè)。對(duì)腦內(nèi)記憶過程的研究只能從人類或動(dòng)物學(xué)習(xí)或執(zhí)行某項(xiàng)任務(wù)后間隔時(shí)間,測(cè)量他們的操作成績(jī)或反應(yīng)時(shí)間,由此來衡量這些過程的編碼形式、儲(chǔ)存量、保持時(shí)...
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一、服務(wù)簡(jiǎn)介動(dòng)物:大鼠,SPF級(jí),健康,雄性造模方法:1,經(jīng)腹腔注射麻醉大鼠;剃除頭頂部毛發(fā)后固定于腦立體定位以上,手術(shù)區(qū)皮膚消毒,切開皮膚,暴露顱骨。2,參照大鼠腦立體定位圖譜(國(guó)內(nèi)多選用包新民的大鼠腦立體定向圖譜),在前后囟2mm、中線外1mm處,用牙科鉆鑿開顱骨,切開硬腦殼膜,用刀置于上述部位的腦表面,降刀4.5mm,外移1mm,再降刀1mm,外移1.5mm,上下抽動(dòng)刀20次,以*切斷穹隆海馬傘??尚袉蝹?cè),也可行雙側(cè)穹隆海馬傘切除。術(shù)后連續(xù)應(yīng)用頭孢唑啉鈉(50mg/kg...
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1.將水迷宮加入適當(dāng)?shù)乃疁乜刂圃?5±1℃。2.實(shí)驗(yàn)前把動(dòng)物帶入實(shí)驗(yàn)室中熟悉環(huán)境。3.設(shè)置軟件。4.一階段:(定位航行)將小鼠頭對(duì)著墻壁依次放入四個(gè)象限水迷宮進(jìn)行實(shí)驗(yàn)(所有小鼠需全部做完后換下一象限)。若動(dòng)物在60s內(nèi)登上平臺(tái)區(qū)域,則結(jié)束。若動(dòng)物在60s內(nèi)未登上平臺(tái)區(qū)域,則用木棍指引大鼠游上平臺(tái),并停留30s。每只小鼠每天訓(xùn)練4次,訓(xùn)練天數(shù)為4天。5.每只動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)束后需用干毛巾擦拭,必要時(shí)需要使用電吹風(fēng)吹干。6.二階段(空間探索):待一象限到第四象限全部做...
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ELASA:用于檢測(cè)未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應(yīng):于各...
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一、服務(wù)介紹免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是指利用抗體與抗原間的特異性結(jié)合特性,將抗原(我們感興趣的靶蛋白)-抗體復(fù)合物從樣品中分離出來,達(dá)到初步分離純化靶蛋白的目的。之后,樣品可以再進(jìn)行Westernblot分析。二、實(shí)驗(yàn)原理免疫沉淀是利用抗原與抗體免疫反應(yīng)達(dá)到純化,定性檢測(cè)蛋白的目的,即在蛋白質(zhì)提取液中加入與抗原(靶蛋白質(zhì))特異性結(jié)合的抗體,抗體與抗原結(jié)合后形成免疫復(fù)合物,再與蛋ProteinA/G或二抗偶聯(lián)的瓊脂糖珠子孵育,通過離心得到免疫復(fù)合...
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目的無菌大鼠的培育中,出生后飼喂的人工配制乳對(duì)于無菌大鼠的培養(yǎng)至關(guān)重要。深度水解蛋白的無乳糖奶粉,便于嬰幼兒吸收,減少了各種消化不良和過敏反應(yīng),那么在無菌大鼠使用的奶中加入這種奶粉是否會(huì)對(duì)無菌大鼠的培育有積極的作用,并且檢測(cè)飼養(yǎng)成功的無菌大鼠的生化指標(biāo)。方法使用清潔級(jí)的SD大鼠,確定臨產(chǎn)期,摘除*宮后,在隔離器內(nèi)剝離大鼠幼崽,使用人工方法哺乳至22d離乳,記錄體重和生存率。使用的配方奶中,加入深度水解蛋白無乳糖奶粉的為實(shí)驗(yàn)組,對(duì)照組中加入全價(jià)配方奶粉。對(duì)培育成功的無菌大鼠在第...
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