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1.麻醉C57BL/J小鼠。2.術(shù)野備用，碘伏消毒。3.在恥骨聯(lián)合上方做1.5cm的切口，拉出一側(cè)睪丸和附睪。4.在體視顯微鏡下，將抽好轉(zhuǎn)染液的胰島素針度的角度插進(jìn)睪丸網(wǎng)與輸出管連接的凸起處，緩慢將轉(zhuǎn)染液注入睪丸生精小管中。5.每側(cè)睪丸網(wǎng)注射50ul轉(zhuǎn)染液，使得睪丸表面大部分生精小管變藍(lán)。6.注射后，停針2min。上海達(dá)為科生物科技有限公司，位于上海長(zhǎng)江軟件園，公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái)，能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè)、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。我們擁有專...

一、動(dòng)物雄性SD大鼠，6-8周齡。二、造模方法模型組大鼠早期肝纖維化通過(guò)每?jī)芍芨骨蛔⑸銫CL4（溶解在橄欖油中）產(chǎn)生，劑量為0.001ml/g/大鼠，時(shí)間4周。對(duì)照組大鼠腹腔注射橄欖油。三、模型評(píng)估最后一次注射CCL4后24小時(shí)處死大鼠，并采集肝組織進(jìn)行病理分析。上海達(dá)為科生物科技有限公司，位于上海長(zhǎng)江軟件園，公司目前具備較好的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái)，能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè)、合作研究、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。...

1.10-12周齡雌性SD大鼠，皮下注射孕馬血清促性腺激素（PregnantMareSerumGonadotropin，PMSG）60IU，48h后頸椎脫臼處死。2.大鼠浸入75%乙醇浸泡5-10分鐘，轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。3.在距離大鼠脊柱1cm、肋下1cm的交叉位置剪開皮膚、肌肉，可見(jiàn)白色的脂肪組織，拉出脂肪組織，可見(jiàn)到粉紅色的卵巢，摘除卵巢。4.取卵巢放入預(yù)冷的含雙抗的緩沖液中，用緩沖液清洗卵巢三次,去除周圍組織及表面包膜。5.在解剖顯微鏡下用1mL的注射器刺破卵泡...

1.3-4周齡雌性SD大鼠，皮下注射孕馬血清促性腺激素（PregnantMareSerumGonadotropin，PMSG）60IU，48h后頸椎脫臼處死。2.大鼠浸入75%乙醇浸泡5-10分鐘，轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。3.在距離大鼠脊柱1cm、肋下1cm的交叉位置剪開皮膚、肌肉，可見(jiàn)白色的脂肪組織，拉出脂肪組織，可見(jiàn)到粉紅色的卵巢，摘除卵巢。4.取卵巢放入預(yù)冷的含雙抗的緩沖液中，用緩沖液清洗卵巢三次,去除周圍組織及表面包膜。5.在解剖顯微鏡下用1mL的注射器刺破卵泡，釋...

激光共聚焦實(shí)驗(yàn)是一種高分辨率的光學(xué)顯微技術(shù)，廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和材料科學(xué)等領(lǐng)域。其原理是利用激光束掃描樣本，并通過(guò)光學(xué)系統(tǒng)將樣本的熒光信號(hào)收集到探測(cè)器中。首先，一個(gè)激光束通過(guò)一個(gè)鏡面反射器被聚焦在樣品上的一個(gè)點(diǎn)上。激光束的波長(zhǎng)通常在可見(jiàn)光范圍內(nèi)，例如綠光或紅光。聚焦點(diǎn)的大小取決于激光束的直徑和聚焦鏡頭的數(shù)值孔徑，較小的聚焦點(diǎn)意味著更高的分辨率。當(dāng)激光束聚焦在樣品上時(shí)，該點(diǎn)處的熒光染料或標(biāo)記物會(huì)被激發(fā)，并發(fā)射出熒光信號(hào)。由于激光束只聚焦在一個(gè)點(diǎn)上，只有該點(diǎn)處的熒光信號(hào)會(huì)被收...

一、制備脾臟單細(xì)胞懸液8周齡C57BL/6小鼠摘眼球放血，無(wú)菌分離脾臟，于70um濾網(wǎng)上研磨收集脾細(xì)胞，過(guò)濾、離心，再以RPMI-1640FD培養(yǎng)液重懸。二、磁珠標(biāo)記1.細(xì)胞計(jì)數(shù)為8×107/mL。2.400×g離心4分鐘，去除上清。3.每107個(gè)細(xì)胞總量使用40μL緩沖液重懸。4.每107個(gè)細(xì)胞總量添加10μLCD8+T細(xì)胞生物素抗體混合物。5.混勻，4℃孵育5分鐘。6.每107個(gè)細(xì)胞加入2mL緩沖液洗滌細(xì)胞，400×g離心4分鐘，去上清。7.每107個(gè)細(xì)胞添加80μL緩沖...

1.8周齡C57BL/6小鼠摘眼球放血。2.在75%的酒精中，浸泡5min。3.無(wú)菌狀態(tài)下取脾臟。4.取一干凈10cm大皿，放入無(wú)菌的70um濾網(wǎng)，將脾臟置于濾網(wǎng)上，加入2ml培養(yǎng)基。5.用研磨棒輕輕研磨臟器，將脾臟組織研磨成單細(xì)胞狀態(tài)，直到只剩下臟器的結(jié)締組織為止。6.研磨時(shí)動(dòng)作應(yīng)輕柔，用力過(guò)大可導(dǎo)致細(xì)胞死亡。7.棄去濾網(wǎng)和濾網(wǎng)上的結(jié)締組織，收集平皿內(nèi)的細(xì)胞懸液，400g4min離心沉淀。8.用PBS重懸沉淀，就可以進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。