精品无码国产一区二区三区av_久久人妻天天av_搡老熟女老女人一区二区_成人h动漫精品一区二区_中文字幕日本人妻久久久免费

咨詢熱線(微信同號(hào))

18017847121

當(dāng)前位置:首頁(yè)   >  產(chǎn)品中心  >  實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)  >  病理染色  >  BrdU熒光染色

BrdU熒光染色

簡(jiǎn)要描述:一類是直接測(cè)定進(jìn)行分裂的細(xì)胞數(shù)來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞增殖能力,如Ki67、BrdU以及EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)等;
一類是通過(guò)測(cè)定活性細(xì)胞數(shù)目來(lái)間接反映細(xì)胞增殖能力,如MTT、CCK-8等。
BrdU熒光染色是直接測(cè)定DNA合成是細(xì)胞增殖檢測(cè)的最準(zhǔn)確方法之一,是測(cè)定物質(zhì)毒性、評(píng)估藥物安全評(píng)價(jià)、細(xì)胞健康的基本方法,其中常用的方法有BrdU標(biāo)記法。

  • 更新時(shí)間:2024-09-18
  • 瀏覽次數(shù):573

詳細(xì)介紹

BrdU熒光染色檢測(cè)原理


用BrdU預(yù)處理的細(xì)胞中,BrdU可代替胸腺嘧啶核苷插入復(fù)制的DNA雙鏈中,而且這種置換可以穩(wěn)定存在,并帶到子代細(xì)胞中。細(xì)胞經(jīng)過(guò)固定和變性處理后,可用免疫學(xué)方法檢測(cè)DNA中BrdU的含量(如采用鼠抗BrdU單克隆抗體特異識(shí)別BrdU,再采用辣根過(guò)氧化酶標(biāo)記的山羊抗鼠IgG二抗標(biāo)記,最后用比色法或熒光的方法進(jìn)行定量測(cè)定),從而判斷細(xì)胞的增殖能力。


BrdU熒光染色實(shí)驗(yàn)步驟


1.細(xì)胞以1.5×105 /ml細(xì)胞數(shù)接種于直徑35 mm培養(yǎng)皿中(內(nèi)放置一蓋玻片),培養(yǎng)1 d,用含0.4%FBS培養(yǎng)液同步化3 d,使絕大多數(shù)細(xì)胞處于G0期。

2.加入BrdU(儲(chǔ)液:1.0 mg/ml,終濃度為0.03 μg/ml),37℃,孵育40min。

3.棄培養(yǎng)液,玻片用PBS洗滌3次。

4.甲醇/醋酸固定10 min。

5.經(jīng)固定的玻片空氣干燥,0.3%H2O2-甲醇30 min滅活內(nèi)源性氧化酶。

6.5%正常兔血清封閉。

7.甲酰胺100℃,5 min變性核酸。

8.冰浴冷卻后PBS洗滌,加1抗即抗小鼠BrdU單抗(工作濃度1:50),陰性對(duì)照加PBS或血清。

9.按ABC法進(jìn)行檢測(cè),蘇木素或伊紅襯染,在顯微鏡下隨機(jī)計(jì)數(shù)10個(gè)高倍視野中細(xì)胞總數(shù)及BrdU陽(yáng)性細(xì)胞數(shù),計(jì)算標(biāo)記指數(shù)(LI)。


注意事項(xiàng)


1.BrdU配制方法:10 mg溶于10 ml雙蒸水,4℃下避光保存

2.BrdU會(huì)肌體造成不可逆損傷,使用時(shí)注意安全,避免吸入BrdU粉塵。



產(chǎn)品咨詢

留言框

  • 產(chǎn)品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯(lián)系電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細(xì)地址:

  • 補(bǔ)充說(shuō)明:

  • 驗(yàn)證碼:

    請(qǐng)輸入計(jì)算結(jié)果(填寫(xiě)阿拉伯?dāng)?shù)字),如:三加四=7
上海達(dá)為科生物科技有限公司
  • 聯(lián)系人:張
  • 地址:上海市長(zhǎng)江南路180號(hào)長(zhǎng)江軟件園B區(qū)B637室
  • 郵箱:2844970554@qq.com
  • 傳真:
關(guān)注我們

歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號(hào)了解更多信息

掃一掃
關(guān)注我們
版權(quán)所有©2025上海達(dá)為科生物科技有限公司All Rights Reserved    備案號(hào):滬ICP備15041491號(hào)-2    sitemap.xml    總流量:127343
管理登陸    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    
日韩精品a片一区二区三区妖精| 美腿制服丝袜国产亚洲| 人妻少妇邻居少妇好多水在线| 久久久受www免费人成| 国产无遮挡又黄又爽免费网站| 韩国三级在线观看久| 国产成人精品久久| 国产激情久久久久久熟女老人| 久久久久成人精品免费播放动漫| 人妻夜夜爽天天爽| 欧美一区二区三区久久综合| 777精品久无码人妻蜜桃| 一二三四在线观看免费视频| 天码av无码一区二区三区四区| 人妻丰满熟妇无码区免费| 亚洲一区二区三区国产精华液| 在线涩涩免费观看国产精品| 久久精品中文无码资源站| 亚洲国产成人精品无码区在线播放| 中文字幕日本最新乱码视频| 亚洲av无码一区二区三区在线播放| 夜夜躁狠狠躁日日躁视频| 老汉精品免费av在线播放| 俺去啦最新地址| 久久婷婷五月综合97色直播| 国产成人乱码一二三区18| 艳妇乳肉豪妇荡乳av无码福利| 色综合久久中文综合网| 黑人粗长大战亚洲女| 五月丁香六月激情综合在线视频| 亚洲av无码一区二区三区网站| 熟女视频一区二区在线观看| 亚洲高清一区二区三区不卡| 国产精品毛片a∨一区二区三区| 人人妻人人澡人人爽欧美一区双| 正在播放熟妇群老熟妇456| 熟女精品视频一区二区三区| 一本大道av伊人久久综合| 无码人妻av一二区二区三区| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 欧美性猛交xxxx乱大交极品|