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結(jié)直腸癌類器官原代培養(yǎng)總結(jié)會

更新時間:2024-05-23      點擊次數(shù):524

2024年58日,周,公司組織,由實驗室主管劉博主導,實驗室全體成員參與,對結(jié)直腸癌類器官原代培養(yǎng)相關知識點,進行了培訓與交流。本次會議,主要針對結(jié)直腸癌類器官原代培養(yǎng),就以下內(nèi)容展開了交流

1.組織4℃條件下從醫(yī)院取回。

2.消毒取樣的15ml管,取出組織,放到10ml大皿中。

3.用含4抗的PBS溶液浸泡,清洗組織。

4.再用組織緩沖液浸泡、清洗三遍。

5.將組織剪成1mm3大小的組織塊,轉(zhuǎn)移到15ml管中消化。

6.在37℃水浴鍋中,消化15min。

7.取少量液體在顯微鏡下觀察,看到較多的單細胞和較少的細胞簇后,終止消化。

8.用100μm篩過濾,然后300g4℃離心5min,移去上清。

9.重懸沉淀,轉(zhuǎn)移到2ml離心管中,300g4℃離心5min,移去上清。

10.估算沉淀的細胞量,以1:25的比例添加基質(zhì)膠,重懸。

11.24孔板鋪板,冰上操作,每孔點膠25ul。

12.鋪板后,放到37℃細胞培養(yǎng)箱中15min成膠。

13.然后每孔添加600ul 結(jié)直腸癌類器官培養(yǎng)基,放到37℃細胞培養(yǎng)箱中。

 

本次會議,提升公司對結(jié)直腸癌類器官原代培養(yǎng)的重要知識點的認知


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