等電位聚焦是一種根據分子攜帶的電荷不同來分離分子的技術。蛋白質同時具有酸性基團和堿性基團，在ph值低于等電點時會帶有正電荷，在電場中向陰極移動。將蛋白質置于有遞增ph梯度的凝膠中電泳，蛋白質所帶電荷會一直減少，直到蛋白質移動到ph值與其等電點相同的區(qū)域。在此處，蛋白質靜電荷為0，因此停止運動，最終蛋白質被“聚焦”在ph值和其等電點相同的窄帶中。

　　蛋白實驗蛋白質雙向電泳實驗注意事項：

　　1.TCA：TCA有毒性，有刺激性氣味，損害呼吸道、眼睛及皮膚，稱量時應戴手套及口罩，避免沾到皮膚及吸入，若不慎接觸，應立即用大量水沖洗后就醫(yī)。TCA易潮解，稱量時應迅速。

　　2.PMSF：PMSF有毒，嚴重損害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚，稱量時應戴手套及口罩，避免沾到皮膚及吸入，若不慎接觸，應立即用大量水沖洗后就醫(yī)。PMSF溶于異丙醇后置于-20℃長期保存，保存中易析出結晶，用前取出待結晶溶化后再使用

　　3.甲醛：有刺激性氣味，易揮發(fā)，其蒸汽強烈刺激粘膜、眼睛，具有致癌性。使用時應戴手套及口罩，在通風櫥內操作。

　　4.甲醇：有毒，能引起失明。DTT：很強的還原性，散發(fā)難聞的氣味。可因吸入、咽下或皮膚吸收危害健康。當使用固體或高濃度儲存液時，戴手套和護目鏡，在通風櫥中操作。beta-巰基乙醇：可致命，對呼吸道、皮膚和眼睛有傷害。丙酮：對神經系統(tǒng)有麻醉作用，并對黏膜有刺激作用。